Egwyddor sylfaenol synthesis DNA

Mae'r synthesis DNA cemegol yn seiliedig ar y strategaeth synthesis cyfnod solet a chemeg ffosfforamidit.Yn wahanol i'r synthesis DNA biolegol, y deunydd mewn synthesis DNA cemegol yw DMT (4, 4-dimethoxytrityl) a deoxyriboxside wedi'i addasu gan ffosfforamidit, fel y dangosir yn Ffigur 1. Mae'r synthesis DNA yn cael ei wneud ar y gefnogaeth solet (gallwn gynnig amryw oColofn Synthesis Oligo), hy CPG (gwydr mandwll rheoledig) a PS (polystyren), ac mae'r synthesis cyfan yn cael ei berfformio ar aSyntheseisydd DNA/RNA, sef ein prif offer, mae gan fodel gwahanol megis: Syntheseisydd Sianel Sengl HY, HY-12, HY-192 ac ati, mae'r cyfeiriad synthesis o 3' i 5 ', a chyflwynir niwcleotid i'r gefnogaeth solet trwy un cylch synthesis.Mae cylch synthesis nodweddiadol yn cynnwys pedwar cam, Dad-ddiogelu, Cyplu, Capio ac Ocsidiad (Ffigur 2).Mae'r Deprotection wedi'i osod i gael gwared ar y grŵp DMT ar y gefnogaeth solet neu'r grŵp hydroxyl 5 ' ar y niwcleosid blaenorol, mae'r asid trichloroasetig 3% mewn dichloromethane yn cael ei ddefnyddio fel yr adweithydd dadamddiffyn.Yna caniatawyd y deoxyriboxyside a addaswyd phosphoramidite i amlygiad hydroxyl grŵp gyda chymorth activator, hy 5-ethylthiotetrazole neu 4, 5-dicyanoimidazole, gan ffurfio y phosphitetriester (III), a sylweddoli y cam Coupling.Mae cam Capio yn cael ei wneud i rwystro'r grŵp hydroxyl nad yw'n adweithio yn ystod y cam cyplu, er mwyn lleihau ffurfio dilyniannau diffyg annymunol.Yn olaf, mae'r phosphitetriester ansefydlog (III) yn cael ei ocsidio i phosphortriester sefydlog cemegol (V) gydag ïodin fel ocsidydd yn y presennol o pyridin.

Gallai'r DNA wedi'i syntheseiddio fod yn holltiad o'r gefnogaeth solet trwy aminolysis, mae'r grŵp gwarchodedig 2-cyanoethyl ar y ffosffortriester a'r amid ar y nucleobase yn hollti ar yr un pryd, mae'r Platiau Synthesis a'r Colofnau Synthesis mewn raciau yn cael eu gosod yn uniongyrchol yn y siambr adwaith o'rOffer Amddiffyn.Gellid paratoi DNA crai gan HPLC, electrofforesis ac OPC ar alw, gallwn hefyd ddarparu'rOffer Puroar gyfer Ôl-brosesu.